新冠总抗检测优于IgM、IgG联合检测

2020-04-24 00:00:00

来源：中国体外诊断网 CAIVD

新型冠状病毒疫情全球仍在不断蔓延，快速识别出新冠感染患者，减少交叉感染，对疫情防控至关重要。核酸检测是新冠病毒检测的金标准，但是受取样影响，检测的敏感性受限，同时由于需要专业设备和人员操作，检测时间周期较长，用于大范围检测效率受影响。抗体检测作为核酸检测的重要补充，操作简单，检测时间一般仅需15-20分钟，已成为新冠诊断的重要手段，极大的加速了新冠诊断的时间。

抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白，大致可分为5类，即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。目前新冠抗体检测试剂主要有总抗体检测、IgM抗体和IgG抗体检测。

新冠抗体检测的方法

根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，免疫学检测抗体的模式主要分为：捕获法、间接法、双抗原夹心法等，以胶体金方法学为例，主要的方法有：（1）捕获法：IgM的检测常用于传染病的诊断。用高纯度重组抗原包被固相，抗人IgM抗体为标记物，以捕获血清标本中的IgM，此法常用于病毒性感染的早期/急性期诊断；（2）间接法：主要用于测抗体，检测模式为T线条包被高纯度重组抗原，以A蛋白为金标记物，检测样本中的抗体；（3）双抗原夹心法：T线包被高纯度重组抗原，金标记物重组抗原，检测样本中的抗体。

胶体金、酶联免疫吸附实验（ELISA）、化学发光、荧光免疫等在多种传染病项目中多采用间接法，但是因抗原制备及试剂生产工艺的影响，常存在假阳性和漏检等局限性，而双抗原夹心法模式是酶标记抗原代替酶标记二抗[1]，胶体金模式是金标抗原代替金标A蛋白，此方法可以检测包括IgM和IgG在内的总抗体，近年来，包含乙肝抗体、梅毒抗体[1]、艾滋病毒抗体[2]、丙肝抗体[3]等领域都已经成功的运用，艾滋病抗体检测更是实现了从间接法到双抗原夹心法第四代检测。在间接法模式中，高浓度的非特异性免疫球蛋白对其结果影响很大，加样检测时样本需要稀释，而双抗原夹心模式，可以选择直接加样，不受类风湿因子等因素的干扰，特异性较捕获法、间接法都高，同时可以检测样本中各类型抗体（包含IgM和IgG）[4]。

通过双抗原夹心检测总抗体，既包含了IgM抗体检测早期诊断新型冠状病毒的优势，又有检测IgG抗体既往感染（包含处于恢复期IgM下降的患者）的特点，可以更好的防止漏检，缩短诊断窗口期，具有更高的特异性和灵敏度，同时节省操作时间和成本、方便快捷，减少交叉污染等优势，在新型冠状病毒检测中具有重要的价值！从已报道的新冠抗体检测研发进展上来看，目前出现的检测IgM和IgG抗体的方法主要是捕获法和间接法，而双抗原夹心的技术难度较高，常用来检测总抗体。

研究证实：新冠总抗体诊断新冠肺炎优于IgM+IgG抗体联合诊断

近期，多篇国际期刊发布了在新冠病毒感染过程中新冠总抗体（Ab）、IgM抗体和IgG抗体诊断新冠感染及与疾病感染时间关系的研究。新冠总抗体的检测采用双抗原夹心法，IgM抗体和IgG检测采用捕获法。3种检测方法中，总抗体检测均显示出比IgM更高的敏感性和特异性。与总抗体相比，单独IgM抗体、IgG抗体、IgM抗体+IgG抗体诊断新冠肺炎的的敏感性均低于总抗体。特异性验证表明新冠总抗体、IgM抗体和IgG抗体的特异性分别为99.1%、98.6%和99.0%[5]。

新冠抗体与疾病感染时间关系的研究显示，在新冠肺炎发病后1-7天，新冠总抗体、IgM抗体和IgG抗体的敏感性分别为38.3%、28.7%和19.1%；发病后8-14天，新冠总抗体、IgM抗体和IgG抗体的敏感性快速升高，分别为89.6%、73.3%和54.1%；发病后15-39天，新冠总抗体、IgM抗体和IgG抗体的敏感性分别达到100%、94.3%和79.8%[6]。

在新冠肺炎患者发病后1-7天内、8-14天及15-39天，核酸（RNA）检测的敏感性分别是66.7%，54%和44.5%。新冠肺炎患者发病后1-7天内、8-14天及15-39天，总抗体+RNA联合诊断的敏感性可以提高到78.7%、97%和100%。在新冠肺炎发病早期（1-7天），抗体检测联合核酸检测可以将单一核酸检测诊断新冠的敏感性提高12%[6]。

针对核酸为阴性的新冠肺炎患者，新冠总抗体、IgM抗体和IgG抗体分别在新冠肺炎患者发病后不同时间均有一定的检出率。核酸阴性的新冠肺炎患者发病后1-3天，新冠总抗体、IgM抗体和IgG抗体的检出率均为28.6%；发病后4-7天，新冠总抗体、IgM抗体和IgG抗体的检出率分别为53.6%、42.9%和28.6%；发病后8-14天，新冠总抗体、IgM抗体和IgG抗体的检出率分别为98.2%、78.9%和70.2%；发病后15-39天，新冠总抗体、IgM抗体和IgG抗体的检出率分别为100%、93.3%和73.3%[6]。

基于双抗原夹心法在机制上的优势，总抗体检测能比单独检测IgM抗体和IgG抗体提前1-3天诊断出新冠感染，并且阳性结果更为明显，可以作为更好的早期诊断新冠肺炎的血清学诊断指标。

总之，基于双抗原夹心法的新冠总抗体检测应该作为不同应用场景下核酸RNA检测的有效补充，以提高新冠肺炎诊断的敏感型和特异性。同时建议总抗体检测的应用场景应包括：临床患者和密切接触者的筛查和管理、重点高危地区人群的筛查、流行病学的调查。

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新冠总抗检测优于IgM、IgG联合检测

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来源：中国体外诊断网 CAIVD

新冠抗体检测的方法

研究证实：新冠总抗体诊断新冠肺炎优于IgM+IgG抗体联合诊断